Patch clamp

[Chloé]

Salut !
Je n'arrive pas très bien à différencier les différentes configurations de patch clamp et ce qu'elles permettent (milieu contrôlé, observation .....)
Serait-il possible de me faire un petit récap s'il vous plaît ?

merci d'avance

[laulauhtn]

Salut Chloé !

Je vais te faire un petit récap !

Les configurations de bases sont :
- Cellule attachée
- Cellule détachée face interne dehors
- Cellule détachée, face externe vers le dehors
- Cellule entière


Cellule attachée
On veut étudier des propriétés d’un canal ionique ou d’un récepteur dans les conditions physiologiques (sans perturber le milieu IC)
- Avantages : le milieu interne de la cellule est conservé et la méthode est non invasive.
- Inconvénients: le milieu interne est non contrôlé donc on ne maîtrise pas les différents signaux transmis au travers de la cellule.

On va pouvoir enregistrer des créneaux qui correspondent aux différentes conformations du canal et vont varier avec la durée d’ouverture du canal.

Configuration cellule détachée face interne vers le dehors

On veut étudier la régulation de l’activité d’un canal ou d’un récepteur par des enzymes, messagers... donc étudier la régulation intracellulaire.
- Avantages : le milieu interne est parfaitement contrôlé
- Inconvénients : perte de facteurs de régulation du canal

On prend la surface de la cellule, on aspire légèrement et on retient avec la micropipette un bout de la membrane. On va pouvoir étudier l’influence du milieu IC sur le récepteur. On étudie donc la régulation IC. Le milieu interne va pouvoir être mis dans une solution dont on peut faire varier la composition.

Configuration cellule détachée face externe vers le dehors

Le but est de déterminer l’affinité d’un agoniste pour le récepteur et de déterminer la sélectivité ionique.
- Avantages : le milieu externe est parfaitement contrôlé
- Inconvénients : perte d’éventuels facteurs de régulation et difficile à obternir

On a la membrane dont on n’en a arraché un bout et la membrane c’est retourné dans l’autre sens. C’est très difficile à obtenir.

Configuration cellule entière

Le but est d’étudier l’activité électrophysiologique de l’ensemble des canaux au niveau d’une cellule entière.
- Avantages : milieux externes et internes bien contrôlés et on enregistre les courants de toute la cellule.
- Inconvénients : perte d’éventuels facteurs de régulation du canal.

On enregistre donc des courants de toute la cellule mais on perd quand même des facteurs de régulation.

J'espère avoir répondu à ta question !

La team physio te souhaite bon courage et te fait de gros bisous <33

[Chloé]

Super ! Merci pour ta réponse rapide, tout est plus clair pour moi maintenant
Merci beaucoup !!!!