Salut enisayb !
En fait, l'
immunofluorescence est une technique d'
immunomarquage, dont le principe est de faire
appel à un anticorps primaire qui va
reconnaître la protéine d'intérêt, et à un
anticorps secondaire qui
reconnaît l'anticorps primaire. C'est l'
anticorps secondaire qui possède le marqueur que l'on
va pouvoir détecter en microscopie.
Attention : Ce qu'on observe au microscope c'est
le marqueur de l'AC secondaire qui est attaché à l'AC primaire lui-même attaché à la protéine.
A aucun moment on ne voit la protéine.
En microscopie
optique, la molécule marqueur de l’anticorps secondaire peut être :
- Une enzyme : Comme une peroxydase qui pourra alors transformer un substrat incolore en
substrat coloré.
- Une molécule fluorescente : une fois excitée par un rayon lumineux, elle émet une
fluorescence observable à l'œil.
Ce sont alors des immunomarquages que l'on peut utiliser en
microscopie optique classique.
Concernant la
microscopie confocale, c'est une technique de microscopie à
fluorescence plus évoluée, qui utilise des
lasers et permet notamment
vision de l'intérieur des cellules à haute résolution. En somme, c'est la
méthode microscopie à fluorescence la plus évoluée.
NB : En ME, la molécule marqueur peut être une bille d’or : elle est opaque aux électrons (e-), là où la bille est présente, les électrons sont arrêtés.
Pour répondre très clairement à ta question, l'
immunofluorescence est utilisée en
microscopie classique et en
microscopie confocale, qui est la technique de microscopie à fluorescence la plus sophistiquée.
J'espère avoir répondu à ta question !
N'hésites pas à reposer une question si ce n'est toujours pas très clair
Ne lâche rien pour cette dernière ligne droite, toute la
team biocell te souhaite plein de courage et passe un bon week-end
<3