Salut Zard,
La chromatographie échangeuse d'ions permet de séparer les acides aminés selon leur
charge. Une chromatographie échangeuse d'ions est composée d'une
résine sur laquelle sont présentes des charges (soit positives, soit négatives) afin de retenir les ions de la charge opposée. On retrouve également une
colonne qui est un solide poreux dans lequel la solution passe et enfin un
collecteur qui permet de récupérer les acides aminés lors de leur élution.
Il existe 2 types de chromatographie échangeuses d'ions :
La chromatographie échangeuse d'anions :
- La résine est chargée
positivement, elle
retient donc les ions
négatifs.
- A un pH élevé, les AA sont sous forme NH2 et COO- donc chargés négativement : ils sont retenus par la résine.
- Grace à
gradient de pH décroissant, les AA vont être élués progressivement : quand le pHi de la fonction acide est atteint, on retrouve les formes COOH et NH3+. L'AA n'est plus chargé négativement, il sera donc élué cad récupéré dans le collecteur.
- Les AA les plus acides sont élués en dernier
La chromatographie échangeuse de cations :
- La résine est chargée
négativement, elle
retient donc les ions
positifs.
- A un pH faible, les AA sont sous forme NH3+ et COOH donc chargés positivement : ils sont retenus par la résine.
- Grace à
gradient de pH croissant, les AA vont être élués progressivement : quand le pHi de la fonction amine est atteint, on retrouve les formes COO- et NH2. L'AA n'est plus chargé positivement, il sera donc élué.
- Les AA les plus basiques sont élués en dernier
Voilà j'espère que tu as mieux compris si jamais ce n'est pas le cas ou que tu as d'autres questions, n'hésite pas ! Bon courage, toute la team bioch est avec toi
