Salut
,
On va reprendre tout ça ensemble.
Les deux méthodes utilise le point isoélectrique pour séparer les acides aminés/peptides.
L'isoélectrophorèse utilise un cylindre remplit de gel dans lequel on instaure un
gradient de pH grâce à une anode et une cathode. L'échantillon contenant les peptides à séparer est déposé en haut. Les différents peptides
migrent jusqu'à ce que le gel soit au même pH que leur pHi, il ont alors une charge globale nulle et s'arrêtent.
La chromatographie quant à elle utilise une
colonne chargée, que ce soit positivement ou négativement, qui est la phase immobile, ainsi qu'une phase liquide qui contient les acides aminés à séparer. Une fois les acides aminés dans la colonne,
le pHi de la solution est modifié afin que les acides aminés changent de charge globale. Les acides aminés qui ont la même charge que la colonne ou qui ont une charge globale nulle sont
élués car il ne sont pas retenus par celle-ci.
En résumé pout
l'électrophorèse c'est la
phase immobile qui change de pH alors que pour la
chromatographie c'est la
phase mobile qui change de pH.
J'espère que cette explication pourras d'être utile.
Bon courage
La team de bioch'